如何進行pcr引物設計

原理：

PCR引物設計的目的是為了找到一對合適的核苷酸片段，使其能有效地擴增模板DNA序列，引物的優劣直接關係到PCR的特異性與成功與否。

原則：

引物應用核酸系列保守區內設計並具有特異性。產物不能形成二級結構。引物長度一般在15到30鹼基之間。G加C含量在百分之40到60之間。鹼基要隨機分佈。引物自身不能有連續4個鹼基的互補。引物之間不能有連續4個鹼基的互補。引物5撇端可以修飾。引物3撇端不可修飾。引物3撇端要避開密碼子的第3位。