米氏常數測定時的要求有哪些

米氏常數測定時的要求有要在沸水浴1min終止反應而後再加入NAOH。米氏常數是研究酶促反應動力學最重要的常數。它的意義如下：它的數值等於酶促反應達到其最大速度Vm一半時的底物濃度〔S〕。它可以表示酶和底物之間的親和能力，Km值越大，親和能力越弱，反之亦然。

米氏常數可以確定一條代謝途徑中的限速步驟：代謝途徑是指由一系列彼此密切相關的生化反應組成的代謝過程，前面一步反應的產物正好是後面一步反應的底物，例如EMP途徑。限速步驟就是一條代謝途徑中反應最慢的那一步，也就是Km值最大的那一步，該酶也叫這條途徑的關鍵酶，它可以用來判斷酶的最適底物。